4D Nucleofector 细胞核转染系统

1、仪器具体介绍：

• 4D细胞核转染系统模块化设计，由Core unit（核心单元），和X unit（X功能单元），和/或Y unit（Y功能单元）等功能单元组成，每个功能单元适合于不同的应用需求。

• 型号：4D

• 厂家：德国Lonza公司

• 组成：

- Core unit（核心单元：为4D-Nucleofector细胞核转染系统提供脉冲；

- X unit（X单元）：支持不同规格、不同细胞数的转染平台；适用于在    16-孔贴壁电转板条中的原位贴壁转染；

- Y unit（Y单元）——提供24-孔细胞培养板中的原位贴壁核转染平台

• 功能搭配：

- 核心单元和各功能单元可以平行拼接或叠放；

- 灵活地选择和组装4D细胞核转染系统；

- 可操控软件：实验者根据实验需求，可以自己设计和存储实验设置；

- USB接口与电脑连接：软件升级和数据传送，如实验者可以通过电脑预先定义实验设置；

- 可接驳96孔shuttle转染仪

2、配套转染试剂盒：

4D-Nucleofector细胞核转染系统采用导电性聚合物，取代了金属铝离子，保证高效转染的同时获得高的细胞存活率。

技术专利

专利的导电性聚合物电转杯和电转板条

-  专利的导电性聚合物材料替代传统的金属铝离子电极

-  克服传统金属电极释放的金属离子（Al3+对细胞的毒性）对转染效果的影响。

-  提高（或维持）转染效率的同时，保证细胞的生理特性。

-  规格：单孔电转杯（100μl）/16孔电转板条（20μl）/24-孔浸入电极板(350 μl/孔)

品种：

X功能单元核转染试剂盒

-  3种细胞系转染试剂盒：SE, SG, SF电转液；

-  5种原代细胞转染试剂盒：P1, P2, P3, P4, P5电转液

-  2种优化转染试剂盒

Y功能单元原位贴壁核转染试剂盒

-  原位贴壁核转染试剂盒AD1：神经元原位贴壁转染；

-  原位贴壁核转染试剂盒AD2

种类：

组成：

- 细胞特异性核转染液

- 添加剂

- pmaxGFP阳性质粒

- 单孔电转杯（100μl）/16孔电转板条（20μl）/24-孔浸入电极板(350 μl/孔)

- 塑料吸管（与单孔电转杯配套）

规格：多种规格，如12RCT、24RCT、32RCT、64RCT、96RCT等

3、原位核转染技术：“原位核转染技术”突破了传统电穿孔技术只能在细胞悬液中转染的缺陷，实现了贴壁细胞在培养的不同阶段中直接进行转染的核转染。

2010年，Lonza推出了4D系统，其中利用X unit的16孔电转板条，推出了第一个原位核转染试剂盒；

2010年，Lonza推出了适用于96孔shuttle系统的新原位转染试剂盒——96孔电转板条。

2011年，Lonza推出了Y unit，可以直接在24孔细胞培养板中进行原位核转染。

“All-in-one” Process——细胞培养、转染、观察和分析都在同一细胞培养板中或电转板中实现。

分离后的原代神经元直接接种到铺有多聚赖氨酸的24孔培养板中或电转板条中。神经元细胞能贴壁培养多达14d，并在培养过程的任何时间点进行转染或多次转染。

优势：

–  可在神经元贴壁生长的任何阶段进行原位核转染或多次进行原位核转染

–  原位转染前、中、后，神经元都培养在24孔细胞培养板中，维持贴壁生长的生理状态

–  唯一转染效率最高可达70%的非病毒转染方法

–  整个过程维持了细胞功能

–  适用于共聚焦显微镜下观察和分析